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Scene 1 (0s)

UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES. FACULTAD DE MEDICINA. II CÁTEDRA DE MICROBIOLOGÍA, PARASITOLOGÍA E INMUNOLOGÍA Profesor Titular: Dr. Norberto Sanjuan MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA I SEMINARIO Nº 2:

2020

Staphylococcus spp. y Streptococcus spp.

Sonido grabado

Scene 2 (1m 26s)

Staphylococcus spp.

Sonido grabado

Scene 3 (1m 54s)

Características microbiológicas

Cocos con coloración Gram positiva (+) Agrupados en racimos Anaerobio facultativo (oxidan y fermentan hidratos de carbono) Catalasa positivos Pueden o no presentar actividad de coagulasa Inmóviles, incapaces de formar esporas Colonizan piel y mucosas (principalmente oral) Resistencia a los anti-microbianos

Tong SYC, Staphylococcus aureus infections: epidemiology, pathophysiology, clinical manifestations, and management. Clin Microbiol Rev doi:10.1128/CMR.00134-14.

Sonido grabado

Scene 4 (6m 9s)

ESPECIE S. aureus S. epidermdis S. capms S. caprae S. saccharob'ticus S. warner} S pasteun S. haemolyticus S. hominis S. lugdunensis S. auricularis S. saprophyticus COAGULASA• FACTOR DE AGRUPAMIENTO*

Especies de importancia médica

Coagulasa positivos Coagulasa negativos S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus S. haemolyticus S. hominis S. capitis

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

Sonido grabado

Scene 5 (8m 8s)

Staphylococcus aureus

'jig-o

Coco agrupado en racimos Inmóvil El 90% presenta cápsula en su exterior Catalasa y coagulasa positivo Presenta factores de agrupamiento (proteínas de unión a fibrinógeno) Presenta adhesinas y tóxinas como factores de patogenicidad (20-30 genes)

Tong SYC, Staphylococcus aureus infections: epidemiology, pathophysiology, clinical manifestations, and management. Clin Microbiol Rev doi:10.1128/CMR.00134-14.

Sonido grabado

Scene 6 (10m 26s)

¿Cómo estudiar la patogenia bacteriana?

Entrada / Infección

-Microbiota -Mecanismos de ingreso

Adhesión

-Adhesinas -Unión a superficies

Multiplicación

-Aumento bacteriano

Diseminación

-Local o diseminada

Evasión

-Evasión de la respuesta inmune

Daño

-Enzimas, proteínas, toxinas

Salida

-Transmisión

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Scene 7 (15m 26s)

Entrada - Hábitat

Colonizan piel y mucosas Nicho preferencial: parte anterior de fosas nasales Colonizan piel sana (incluyendo pliegues y periné) Colonización permanente o transitoria Contaminación de materiales estériles

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

Sonido grabado

Scene 8 (18m 36s)

Adherencia

Pared celular: Peptidoglicano: Cadenas de N-acetilglucosamina y ácido N-acetilmurámico Estructura > 10 capas Enlaces de puente peptídicos entre disacáridos Plasticidad y resistencia Sitio de anclaje de adhesinas Reconocimiento por respuesta inmune Sistema regulador: Enzimas PLP Ácidos teicoicos 50% peso seco Metabolismo de pared celular Adhesión a epitelios Ácidos lipoteitoicos Anclados en membrana plasmática Inducción de liberación de citoquinas inflamatorias

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

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Scene 9 (23m 36s)

Cápsula: Polisacáridos. 11 serotipos diferentes Antifagocitarias y aumentan la virulencia Biopelícula o biofilms Trama extracelular de polisacáridos y proteínas Bacterias en fase latente Contaminación de materiales estériles

Sanjuan , N. et al. Neurol . Res., 2015

Sonido grabado

Scene 10 (28m 36s)

ALT Proteinas de superficie AT

Transglumsidasa licinaiS GliCinax5 Glicinax5 Transpeptidasa Peptidoglucano 3 NH S CH3 Inhibiciån pr pnicilina 4 Membrana plasmåtica 2 PBP

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

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Scene 11 (30m 32s)

Adhesinas Adhesión a proteínas de la matriz Factor de agrupamiento B (ClfB)  colonización epitelio nasal Proteínas de unión a fibronectina (FnBPA y B) Proteína de unión al colágeno (cna) Proteína A Proteínas de regulación inmune

Fracciön Fc S aureus queda EX)r la Ig G J, proteina A La fracci6n Fc nose unir celular

0 capa isacåricbs Capa pQtidoglicanos Polisocåricb A teicoicO) ci+småtica Coagulasa "gada y OtraS proteinas

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

Sonido grabado

Scene 12 (34m 28s)

Daño

Exoenzimas: Catalasa: contrarresta lisis oxidativa Coagulasa: corta fibrinógeno Proteasas Hialurodinasa, lipasa y elastasa: daño tisular ADNasa Proteínas activas de membrana Hemolisinas: hemolisina α (poro lítico), hemolisina β (esfigomielinasa), hemolisina γ (leucocidina) y hemolisina δ Leucocidina de Panton-Valentine: vinculado a cuadros de infecciones respiratorias y de piel y partes blandas

PVL. LukAB,'GH LukED. Hig Hla PSM SPA vWbp ClfAJB CHIPS FnBPA.'B Fibrin clot SCIN @3C3

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

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Scene 13 (39m 28s)

Tóxinas Tóxina exfoliativa Exfoliativa A (ETA) codificada en fago y Exfoliativa B (ETB) codificada en plásmido Afectan estrato granuloso, no mucosas Proteasa de serina Mólecula diana  desmogleína-1 (Dsg 1)

B. corneum stratum granulosum stratum spinosum stratum basale l)sg-l cz Dsg-3

Sonido grabado

Scene 14 (42m 19s)

Superantígenos Tóxina 1 del síndrome del shock tóxico (TSST-1) Unión a diferente sitio del Linfocito T Activación hasta el 20% de la población T Liberación masiva de citoquinas inflamatorias Arquitectura molecular similares

Standard View Back Vß-TCR binding Site tkxiecapeptide cen birding site

T cell TCR 1 Conventional Ag MHC II Antigen presenting cell superantigen

Sonido grabado

Sonido grabado

Scene 15 (47m 19s)

Superantígenos Enterotoxinas estafilococicas (ETE) 15 enteretoxinas Intoxicación alimentaria por ingesta de toxinas que han sido liberadas en alimentos Termoestables SEA, SEB y SEC son las relacionadas con intoxicación alimentaria y SEB y SEC con shock tóxico No se conoce aún el mencanismo

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Scene 16 (49m 51s)

Regulación

agr (accesory gene regulator) Mecanismo de detección del quórum Facilita expresión de adhesinas durante fase exponencial y modificina expresión de exoproteínas durante fase estacionaria Proteínas de unión al ADN Sar A ARN pequeños

Ag AIP O AgrB Activaciön de la transcripciön RNAIII Traducciön de exoproteinas

lie Ed d IllVNHJ6e llVNUJ6e

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Scene 17 (52m 49s)

Resistencia antibiótica

Desarrollo de resistencia a casi la totalidad de antibióticos conocidos (principalmente inhibidores de pared e inhibidores ribosómicos) S. aureus meticilina sensible (SAMS) S. aureus meticilina resistente (SAMR): Aumento de la prevalencia a partir de la década del ‘60 Principalmente en el medio intra-hospitalario Aumento de casos en la comunidad en la última década (diferente al hospitalario) Resistencia intrísenca a partir del gen mecA que codifica a la proteína PBP2A Tratamiento de referencia con vancomicina (glucopéptido) S. aureus resistente a vancomicina (SARPV): Resistencia a partir de trasposones. Fenotipo VanA

Turner N.,Methicillin-resistant Staphylococcus aureus: an overview of basic and clinical research, https://doi.org/10.1038/ s41579-018-0147-4

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Scene 18 (57m 30s)

Patogenia

Distribución: 1) piel y partes blandas, 2) vía respiratoria inferior, 3) bacteriema y endocarditis Infecciones nosocomiales Factores de riesgo: edad, hemodiálisis,diabetes, cáncer activo Portador nasal crónico Portador: 1) persistente, 2) intermitentes y 3) no portadores

Colonización

Diseminación

-Directa -Toxinas

Inmunidad Innata

Extensión profunda

Bacteriemia

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

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Scene 19 (1h 2m 30s)

Infecciones de piel y partes blandas

Glandula sebäæa Foliculo piloso Buu piloso Glandula sudoripara Epidermis Papilas dérmicas Müsculo del pelo Dermis Hipodermis

Pioderma primario: Epidermis  Impétigo Dermis superficial  Foliculitis Dermis profunda  Forúnculo Tejido celular subcutáneo  erisipela, celulitis y fascitis

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

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Scene 20 (1h 4m 12s)

Impétigo

Foliculitis

Forúnculo

Forunculosis

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Scene 21 (1h 8m 0s)

Erisipela

Celulitis

Sonido grabado

Scene 22 (1h 9m 47s)

Neumonía

Osteomilitis

Infección protésica

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Scene 23 (1h 13m 58s)

Bacteriemia y sepsis

Proinflammatory respnse Pathogen factors Virulence Pathogen-assæiated molecular patterns Excessive inflammation causing collateral damage (tissue injury) Perpetuation of inflammation o TLRs Endosome Host cell o CLRs NLQ RLRs Cytokines Proteases Reactive species activation regulation Complement products Complement activation Coagulation proteases Coagulation activation Damage-associated molecular patterns 4) Necrotic cell death Brain Vagus Celiac nerve ganglion Spleen intestine Norepinephrine Acetylcholine Inhibition cytokine production Impaired fi'nction of immune cells Of T, B, and dendritic cells Expansion of regulatory T and myeloid suppressor cells Impaired phagocytosis Inhibition of proinflammatory gene transcri ption 1 Antiinflammatory cytokines Soluble cytokine receptors Negative regulators of TLR signaling Epigenetic regulation Host Environment Genetics Other illnesses Medications Hypothalamic— pituitary— adrenal axis Adrenal Catecholamines gland Cortisol Antiinflammatory response Immunosuppression with enhanced susceptibility to secondary infections

N Engl J Med 2013;369:840-51. DOI: 10.1056/NEJMra1208623

Sonido grabado

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Scene 24 (1h 18m 10s)

Tissue hyp«usion anticoagulation coagulation t Tissue factor NETs with trapped platelets Tissue factor pathway inhibitor Antithrombin Endothelial cell Endothelial protein C receptor Loss of barrier function PARI SIPI SIPI Protein C Activated protein C Vasodilatation pressure Red-cell deformabiliw $ Tissue oxygenation Organ failure Activated protein C and t thrombin VE cadherin and Tight junctions t Angiopoietin 2 Cell shrinkage and cell death , '*Thrombus ' Release of mitochondrial contents t PAI-I Fibrinolysis Thrombosis Tissue hypoperfusion Mitochondrial dysfunction Capillary leak and interstitial edema Loss of barrier function

N Engl J Med 2013;369:840-51. DOI: 10.1056/NEJMra1208623

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Scene 25 (1h 19m 44s)

Endocarditis infecciosa

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Scene 26 (1h 21m 40s)

Piel escaldada

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Scene 27 (1h 22m 43s)

Toma de muestra  lesiones, anatomía patológica, hemocultivos Translado al laboratorio. Cultivo, bacterioscopía , caracterización bioquímica, antibiograma.

Diagnóstico de laboratorio

'02655128'

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Scene 28 (1h 26m 6s)

Microscopía

Sonido grabado

Scene 29 (1h 26m 39s)

Cultivos y caracterización

Agar sangre

Agar manitol

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Scene 30 (1h 28m 42s)

COAGULASE +

Test de coagulasa

Test de catalasa

Sonido grabado

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Scene 31 (1h 30m 39s)

Biología molecular

34 567 8 10 11 1500 750 50 bp

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Scene 32 (1h 32m 26s)

ood

Pruebas de suceptibilidad

Sonido grabado

Scene 33 (1h 33m 47s)

PROFILAXIS

IDENTIFICAR Y TRATAR A PORTADORES DE S. aureus RESISTENTES A LA METICILINA.

Sonido grabado

Scene 34 (1h 36m 27s)

Staphylococcus coagulasa negativos

Especies más frecuentes: S. epidermidis, S. saprophyticus, S. lugdunensis y S. haemolyticus Micro-flora normal de piel y mucosas. Diferencias en distribución anatómica (Ej S. capitis en cuero cabelludo, o S. saprophyticus en tubo digestivo) Factores de patogenicidad: Bio-films  adherencia, maduración (sistemia PIA) y dispersión Ácido poli-gamma-DL-glutámico (PGA) Sistema Aps Péptidos antimicrobianos

S. epidermidis

S. lugdunesis

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Scene 35 (1h 41m 27s)

Bacteriemia, endocarditis e infección de dispositivos

Sonido grabado

Scene 36 (1h 43m 17s)

Streptococcus spp.

Scene 37 (1h 43m 23s)

Características microbiológicas

Cocos con coloración Gram positiva (+) dispuestos en cadena / pareja Catalasa negativos Estrictos desde el punto nutricional Anaerobios facultativos Flora normal y patógenos primarios

S

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

Sonido grabado

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Scene 38 (1h 45m 31s)

Clasificación

REACCIÖN HEMOLiTlCA ESPECIE S, pyogenes S agalactiae S dysgalactjae subsp. equisimilis S pneumoniae y especies del grupo S. mitis Esgxies del grupo S. angmsus Esgxies del grupo S ±vis ANTiGENO(S) DE LANCEFIELD Nirgün antigeno detectable o sir utilldad para la dfereraaclön A, C, F. G o ningün antigeno detectable

Group Anginosus (milleri) Mutans In species S. gallolyricuS S. infantarius S. alactolyticus S. mitis S. gordonii S. oralis S. p a rasa*tguinis S. sanguinis S. anginosus S. constellatus S. intermedius S. mutans S. downei S. sobrinus S. vestibularis

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

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Scene 39 (1h 48m 39s)

Streptococus pyogenes

Estreptococos del grupo A, dispuestos en cadenas cortas Catalasa negativos Hemólisis completa (β-hemólisis) Flora normal de piel y mucosa yugal Constituyentes somáticos y productos extracelulares

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Scene 40 (1h 50m 17s)

Constituyentes somáticos

Cápsula de ácido hialurónico  inhibición de fagocitosis Pared celular de peptidoglicano Proteína M: Si la presentan, mayor virulencia Dímero anclado en membrana que atraviesa pared Inhibicón vía alterna del complemento Factor de opacidad del suero (FO) Adhesinas: Ácido lipoteitoico (ALT) Proteína M Proteínas de unión a la fibronectina (PrtF1, SfbI)

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

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Sonido grabado

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Scene 41 (1h 55m 17s)

Daio tmgaciön cehdz y de defesa Resistencia a Paed celu.lz N-terüd C.•sula Lisu celulu

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Scene 42 (1h 56m 43s)

Productos extracelulares

Hemolisinas: Streptolisina O Streptolisina S Enzimas (vinculadas en daño a partes blandas) ADNasa (A-D) Hialuronidasas Estreptocinasa C5a peptidasa Exotoxinas pirógenas estreptocócicas Exotoxina B pirógena estreptocócica (SpeB) SpeA (vinculada con shock tóxico) SpeC (vinculada con escarlatina) Superantígeno estreptocócico (SSA)

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

Sonido grabado

Sonido grabado

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Scene 43 (2h 1m 15s)

Estreptolisina O Peptidasa C5a PMN Bacteria

Sherrys, 16ta edición, 2018. Adaptación

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Scene 44 (2h 2m 51s)

NET • Ill) SECRETED production • ENZYMES cytokine • IL-8 : > specyp phagocyte apoptosis 1) ADHESION & INVASION recognition & phagocytosis F protein M protein hyaluronic acid capsule 11) ANTIPHAGOCYTIC FACTORS soluble M protein csa neutrophil recruitment

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Scene 45 (2h 4m 13s)

Patogenia

Faringitis

Cepa del grupo A de mayor frecuencia Principalmente en la infancia Transmisión: gotitas de saliva o secreciones nasales Colonización de orofaringe Vinculado con los M-tipificables Odinofagia y fiebre Edema, hiperplasia linfoide, hiperemia y exudados parcheados

IL—17A Thl 7 IL. 12 Thl cell

Mandell, 8va edición, 2017. Adaptación

Sonido grabado

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Scene 46 (2h 7m 51s)

Escarlatina

Cepas que presentan exotoxinas pirógenas Exantema en tronco y miembros y oclusión de glándulas sudoríparas Escarlatina séptica y tóxica

Sonido grabado

Scene 47 (2h 9m 47s)

Pioderma primario

Principalmente producidos por SGA Diferentes cepas a las faríngeas

Impétigo

Infecciones tejidos blandos

Erisipela

Celulitis

Sonido grabado

Scene 48 (2h 12m 16s)

Fascitis necrotizante

Sonido grabado

Scene 49 (2h 14m 21s)

Síndrome del shock tóxico

A Group A stre ptococci Fibrinogen M protein M protein released from bacterial surface M protein—fibrinogen aggregate Polymorphönuclear• Degranulation Respiratory burst Endothelial damage M protein—fibrinogen aggregate Endothelium Vascu ar s nus,-lé

Brown EJ. The molecular basis of streptococcal toxic syndrome. NEJM 2004; 350:2093.

Sonido grabado

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Scene 50 (2h 17m 37s)

Miocarditis, endocarditis infecciosa, fiebre reumática

Sonido grabado

Sonido grabado