PPT TEST_Protocole de Terrain DEFEND Senegal_Draft 02_DrOSY_BS_260123 copie

PROJET DEFEND Protocole des activités de terrain 1. Contexte et justification Le paludisme reste un défi majeur de santé publique au Sénégal et en Afrique subsaharienne. Les stratégies de contrôle vectoriel actuelles reposent principalement sur les moustiquaires imprégnées d'insecticide et la pulvérisation intra domiciliaire. La persistance d’une transmission résiduelle, en particulier liée aux comportements exophages et exophiles des moustiques vecteurs, limite l’impact de ces stratégies. Dans ce contexte, le projet DEFEND vise à explorer de nouvelles méthodes complémentaires non létales et durables, notamment l'utilisation d'appâts sucrés toxiques ciblant les moustiques adultes. Ce protocole décrit l'optimisation et la mise en place sur le terrain d'un dispositif d'interception et d'alimentation des moustiques (station de Lehmann) intégrant une souche bactérienne de Delftia tsuruhatensis (TC1) comme agent de contrôle potentiel du Plasmodium en bloquant son développement chez le moustique. 2. Objectifs du protocole de terrain 2.1 Objectif général Évaluer l’impact entomologique de l’exposition des vecteurs du paludisme à la bactérie TC1 via des stations ASB dans différents contextes éco-épidémiologiques du Sénégal. 2.2 Objectifs spécifiques • Déterminer l’abondance, la composition spécifique et la dynamique saisonnière des populations de moustiques • Caractériser les comportements d’alimentation sucrée et de repos des vecteurs • Évaluer l’exposition effective des moustiques aux stations ASB-TC1 • Comparer les indicateurs entomologiques avant, pendant et après l’intervention • Évaluer la faisabilité opérationnelle et l’acceptabilité communautaire de l’intervention TC1. 3. Sites d’étude et stratégie de sélection L'étude sera menée au Sénégal dans deux environnements éco-épidémiologiques distincts : • Zone de faible transmission : District sanitaire de Diourbel • Zone de forte transmission : Districts sanitaires situés dans l’axe Tambacounda - Kédougou..

Dans chaque zone, des villages sentinelles seront sélectionnés et organisés en clusters, définis comme des ensembles de concessions contiguës partageant des caractéristiques spatiales similaires (proximité des gîtes larvaires, sources de nectar, structures d’habitat). 3.1 Sélection des villages sentinelles Six (6) villages sentinelles stratégiques seront sélectionnés le long de l’axe Diourbel–Kédougou selon une méthodologie rigoureuse en quatre (4) phases successives (SOP 01): Phase 1 : Identification initiale des sites potentiels • Identification d’environ quarante-cinq (45) sites potentiels • Collecte de données entomologiques exploratoires, environnementales, sanitaires et sociales • Compilation des données issues des centres et postes de santé locaux. Phase 2 : Première pondération multicritère • Application d’une pondération multicritère afin de réduire la liste à environ vingt (20) sites • Analyse comparative des sites selon les critères prédéfinis. Phase 3 : Seconde pondération et sélection finale • Pondération secondaire focalisée sur les critères clés pour l’intervention TC1 • Sélection finale de six (6) villages sentinelles. Phase 4 : Sélection des ménages et clusters de suivi • Sélection des ménages cibles au sein des villages • Définition des clusters de suivi entomologique • Obtention des consentements éclairés communautaires et individuels. 3.2 Critères de pondération et de sélection des sites Les critères incluront notamment : • l’incidence palustre locale (Centres et postes de santé) • la densité et la diversité vectorielle • la couverture en MILDA • la taille, l’accessibilité et la superficie des villages.

• l’acceptabilité sociale • la proximité de gîtes larvaires majeurs Figure 1 : Sélection des villages sentinelles (approche en 4 phases) 4. Design général de l’étude et phases opérationnelles Il s’agit d’une étude longitudinale structurée en trois phases successives : • Phase 1 : Baseline (Pré-intervention) • Phase 2 : Mise en œuvre de l’intervention ASB–TC1 • Phase 3 : End line (Post-intervention) 4.1 Phase 1 : Baseline (SOP 1, SOP 3, SOP 4, SOP 5) Objectifs : Établir les niveaux de référence des indicateurs entomologiques et des facteurs environnementaux susceptibles d’influencer l’efficacité de l’intervention ASB–TC1. Activités clés : • Sélection finale des villages et clusters • Description de l’environnement écologique • Cartographie GPS des ménages, chambres et sites de repos • Collectes entomologiques par CDC-LT, Prokopack et aspirateur à bouche • Détermination des indicateurs entomologiques • Inventaire botanique des sources de sucre naturelles • Collecte des données épidémiologiques contextuelles..

4.2 Phase 2 : Mise en œuvre de l’intervention ASB–TC1 (SOP 2, SOP 4, SOP 5) Objectifs : Déployer, maintenir et optimiser les stations Lehmann–TC1, et suivre l’exposition des moustiques à l’appât sucré toxique. Description et fonctionnement du dispositif Lehmann Le dispositif Lehmann modifié est conçu pour intercepter les femelles d'anophèles lorsqu'elles tentent de pénétrer dans les habitations pour un repas sanguin (attraction par les odeurs humaines). Le dispositif bloque l'accès à l'intérieur de la pièce tout en proposant des cotons imbibés d'une solution sucrée contenant la bactérie TC1 Figure 2 : Station d'alimentation Lehmann Activités clés : • Installation des stations dans au moins 25 % des maisons • Remplacement des cotons imbibés tous les 2 jours • Suivi de l’état des dispositifs (présence, intégrité, humidité). • Suivi entomologique mensuel (4 nuits/mois) pour mesurer la colonisation par TC1 4.3 Phase 3 : End Line Objectifs : Mesurer l’impact entomologique et épidémiologique de l’intervention ASB–TC1 Activités clés : • Répétition des collectes entomologiques selon les mêmes méthodes • Comparaison des indicateurs Baseline vs End line, notamment indices sporozoïtiques • Analyse intégrée des données entomologiques et épidémiologiques • Enquêtes sur l'acceptabilité communautaire de l'outil.

5. Échantillonnage entomologique et méthodes de collecte Un échantillonnage aléatoire stratifié sera mis en œuvre pour capturer les moustiques agressifs et au repos, à l'intérieur (endophagie / endophilie) et à l’extérieur (exophagie / exophilie) des habitations conformément aux SOPs de terrain ci-joints. 5.1. Cartographie et sélection des sites de capture Dans chaque village/cluster, un échantillon aléatoire de 10 à 20 chambres et de 10 à 20 sites de repos extérieurs sera sélectionné. L’ensemble des sites de capture sera géoréférencé par GPS, codifié de manière unique et intégré dans la base de données de terrain du projet, conformément à la SOP 2. 5.2. Techniques de capture des moustiques adultes Plusieurs méthodes standardisées et complémentaires seront utilisées de manière concomitante pour une collecte exhaustive : • Pièges lumineux CDC (CDC-LT) : Installés à l'intérieur et à l'extérieur de 3 maisons fixes, pendant 2 nuits consécutives par mois, conformément à la SOP 03..

[Audio] The process of identifying and classifying Anopheles mosquitoes involves several key steps: sorting, identification, classification, and conservation. Sorting and classification are critical because they allow researchers to understand the population dynamics of the mosquito species. Identification is typically done using morphological characteristics such as wing shape, size, and color. Classification is often based on genetic information, but can also be determined through morphological characteristics. Conservation methods are used to preserve the specimens for future study. The goal is to accurately identify and classify each individual mosquito, taking into account its sex, physiological state, and any relevant environmental factors. This allows researchers to better understand the ecology and behavior of the mosquito species. By understanding these factors, researchers can develop more effective strategies for controlling the spread of malaria and other diseases..

7. Données épidémiologiques et analyse statistique Outre les données entomologiques, des données épidémiologiques contextuelles (incidence du paludisme : nombre de cas et décès) seront collectées rétrospectivement dans les registres des postes de santé locaux. Les données entomologiques (abondance, taux de parité, taux d'infection, taux de prise de repas sucré) seront analysées à l'aide de modèles linéaires mixtes généralisés (GLM) pour tenir compte de la structure hiérarchique des données (moustiques au sein des maisons, maisons au sein des villages/clusters). 8. Considérations éthiques et autorisations Le protocole DEFEND a reçu les approbations éthiques nationales et institutionnelles nécessaires au Sénégal et au Burkina Faso. Toutes les activités impliquant l'accès aux habitations et la collecte de données médicales se feront après obtention du consentement éclairé des chefs de village et des résidents concernés. 9. Chronogramme des activités Légende : 🟦 Phase Baseline | 🟧 Phase Mise en œuvre / Intervention | 🟩 Phase End line Phases Activités Clés Mars - Mai Juin - Août Septembre Oct. - Mars Avril - Juin PRÉPARATION Cartographie, éthique & logistique 🟦 BASELINE Collectes de référence (CDC LT/Prokopack) 🟦 INTERVENTION Installation des stations Lehmann-TC1 🟧 MAINTENANCE Remplacement des appâts (toutes les 48h) 🟧 🟧 SUIVI Collectes mensuelles (Impact TC1) 🟧 ENDLINE Évaluation finale, Enquêtes & Retrait 🟩.

10. Gestion Opérationnelle et Ressources 10.1. Ressources Humaines Personnel Nombre par Village Total (6 villages) Rôle Principal Coordinateur National / PI - 1 Supervision scientifique et stratégique. Superviseurs de Zone - 2 Coordination logistique (Diourbel et Tamba-Kédougou). Techniciens Entomologistes - 10 Identification, dissections et gestion du labo terrain. Agents de maintenance (Relais) 4 24 Maintenance des stations TC1 toutes les 48h. Agents de Collecte (Repos) 2 12 Captures matinales (Prokopack et CDC LT). Chauffeurs - 3 Transport des équipes, du matériel et des échantillons. TOTAL GÉNÉRAL 7 52 10.2. Besoins en Matériel et Équipements Matériel / Équipement Quantité estimée Usage Principal Location de Véhicules 4x4 3 véhicules Mobilité sur l'axe Diourbel-Kédougou (contrat mensuel). Stations de Lehmann (ASB) 150 unités Support d'administration de la bactérie TC1. Aspirateurs Prokopack 8 unités Capture des moustiques dans les abris extérieurs. Pièges CDC Light Trap 20 unités Collecte nocturne automatisée Aspirateurs à bouche 30 unités Récupération des moustiques dans les pièges et stations. Lampes frontales (LED) 20 unités Éclairage pour les collectes matinales (Aspirateur/Prokopack). Piles rechargeables + Chargeurs 80 piles Énergie pour les pièges CDC et les lampes. GPS (Garmin ou Smartphone) 8 unités Localisation des ménages et des gîtes. Loupes binoculaires portatives 4 unités Identification et dissections sur le terrain. Glacières de transport 10 unités Transport de l'inoculum et des échantillons. Kits de dissection 10 kits Outils pour l'examen de la parité (âge des moustiques)..

10.3. Consommables et Carburant (Estimation pour 6 mois) Désignation Quantité estimée Note Logistique Carburant (Diesel) 4 500 Litres Est. 250L/véhicule/mois + trajets inter-zones. Saccharose (Sucre pur) 100 kg Base de la solution attractive pour les stations. Inoculum TC1 Fourniture continue Bactérie vivante préparée par l'UCAD et GSK Coton hydrophile stérile 200 rouleaux Support d'imprégnation pour les stations (48h). Tubes Eppendorf (0,5 / 1,5 ml) 7 000 unités Stockage individuel des spécimens (ajusté). Silica Gel 15 kg Préservation des moustiques par dessiccation. Éthanol (70% - 95%) 30 litres Conservation pour analyses moléculaires. Gants et Masques jetables 60 boîtes Hygiène lors de la manipulation de TC1..