Presentación de PowerPoint

Published on
Scene 1 (0s)

LA VITAMINA D INHIBE LA EXPRESIÓN DE INTERLEUCINA-8 EN CÉLULAS DEL LIGAMENTO PERIODONTAL HUMANO ESTIMULADAS CON PORPHYROMONAS ASESOR: GINA INGRID GUERRA CASTILLO

REFERENCIA DEL ARTÍCULO: Xiaolin Tang, Yaping Pan, Yanyan Zhao. La vitamina D inhibe la expresión de interleucina-8 en células del ligamento periodontal humano estimuladas con Porphyromonas gingivalis. 2012; 58: 397-407.

Scene 2 (20s)

Integrantes :Linekth Manuela Cañas. Asesora : Gina Ingrid Guerra Castillo Universidad de Antioquia Escuela de Nutrición y Dietética Bioquímica Nutricional Medellín, 7 de abril de 2021

Scene 3 (33s)

INTRODUCCIÓN

Scene 4 (39s)

PERIODONTITIS:

DIENTE SANO

PERIODONTITIS

Es una grave infección de las encías que daña el tejido blando y que sin un debido tratamiento puede conducir a la destrucción del hueso que sostiene los dientes . Esta puede hacer que los dientes se ablanden o se pierdan por completo. Su mayor característica es la pérdida de tejido conectivo y hueso alveolar. (1)

Consecuencia

Principal

Placa dental.

Condiciones nutricionales. Condiciones endocrinólogas .

PLACA BACTERIANA.

Scene 5 (1m 5s)

PERIODONTITIS:

PATOGENOS PERIODONTALES

PORPHYROMONAS GINGIVALIS (P. GINGIVALIS)

BACTERIA ANAEROBIA GRAM-NEGATIVA, ESTÁ MÁS FUERTEMENTE ASOCIADA CON LA PERIODONTITIS CRÓNICA .

QUE CAUSA

INFLACACION

DESTRUCCION PERIODONTAL .

Scene 7 (1m 25s)

Sustancia nutritiva .

Tipo de hormona esteroide.

Importante en el mantenimiento del calcio y el fosforo.

la vitamina D puede participar activamente en la regulación del proceso de inmunidad e inflamación, además esta vitamina ejerce sus efectos biológicos al unirse al receptor de vitamina D (VDR). Investigaciones anteriores han demostrado la asociación entre el polimorfismo del gen VDR y la periodontitis, lo que indica que la vitamina D / VDR puede desempeñar un papel importante en la aparición y el proceso de la periodontitis.

Scene 8 (1m 53s)

CELULAS DEL LIGAMENTO PERIODONTAL H .

(hPDLC)

Consisten principalmente en fibroblastos de los tejidos del ligamento periodontal, participan no solo en el mantenimiento de los tejidos periodontales sino también en la regulación de la inflamación periodontal.

Scene 9 (2m 9s)

P. GINGIVALIS Y SUS COMPONENTES PUEDEN MEJORAR LA PRODUCCIÓN DE CITOCINAS PROINFLAMATORIAS EN LAS hPDLC

IL-6

IL-8

Puede desempeñar un papel en la modulación de la cascada inflamatoria de la periodontitis crónica.

Es una citocina y quimiocina proinflamatoria importante, que puede inducir de manera potente la quimiotaxis en sus células diana.

ESTRECHAMENTE RELACIONADAS CON LA PERIODONTITIS

Scene 10 (2m 31s)

OBJETIVO GENERAL

Scene 11 (2m 38s)

INVESTIGAR EL EFECTO DE 1,25D SOBRE LAS EXPRESIONES DE IL-6 E IL-8 EN HPDLC TRATADAS CON P. GINGIVALIS W83.

Scene 12 (2m 49s)

DISEÑO EXPERIMENTAL

Scene 13 (2m 56s)

METODOLOGIA

CULTIVOS DE CELULAS .

1

CEPAS BACTERIANAS, CULTIVO Y RECUENTO.

2

TRATAMIENTO DE hPDLC CON P. GINGIVALIS W83

3

TRATAMIENTO DE hPDLC CON 1,25D

4

TRATAMIENTO DE hPDLC CON 1,25 D COMBINADO CON P. GINGIVALIS W83

5

NIVELES DE PROTEÍNA DE IL-6 E IL-8 DETECTADOS POR ENSAYO INMUNOABSORBENTE LIGADO A ENZIMAS (ELISA)

6

NIVELES DE ARNM DE IL-6 E IL-8 DETERMINADOS POR RT-PCR CUANTITATIVA EN TIEMPO REAL.

7

Scene 15 (3m 30s)

Objetivo : Observar la accion de la P.gingivalis en las hPDLC

Discusión: Se pudo observar que la forma fusiforme de las hPDLC cambió a una forma poligonal y aparecieron más partículas intracelulares en las hPDLC, que en la MOI de 10 y de 100 la P.gingivalis ejerce poco efecto sobre la aparición de hPDLC, aunque en el MOI de 1000 y se colapsaron totalmente con P. gingivalis.

Scene 16 (3m 54s)

Objetivo : Cuantificar la expresion de proteinas de IL-6 e IL-8 en hPDLC tratado con P.gingivalis.

Metodología : Los niveles de ambas proteínas en los sobrenadantes de cultivo de hPDLC se detectaron mediante kits ELISA. Discusión:  La P. gingivalis promovio notoriamente la expresion de proteinas tanti IL6 como IL8 de una manera dependiente de dosis y tiempo.

Scene 17 (4m 16s)

Objetivo: Iddentificar la expresion de IL6 en hPDLC tratados con 1,25D

Metodología:  Las hPDLC del paso 4 se sembraro a una concentracion de 1T 10 4 Celulas/cm2 en placas de 24 pocillos. A los 8 dias, las celulas se trataron con 1,25D durante 12h, 24h y 48h. Tambien se trataron celulas con alcohol etilico al 0,1% como control. Se recogieron las muestras de liquido sobrenadante y se determno la concentracion de IL6 con ensayo de inmuno absorcion ligado a enzimas ELISA. Discusión: Se observó que la 1,25D sola no ejerce ningún efecto sobre la expresión de la proteína y el ARNm de IL6 en hPDLC.

Scene 18 (4m 51s)

Objetivo: Identificar la expresión de IL8 en hPDLC tratados con 1,25D

Metodología:  Las hPDLC del paso 4 se sembraron a una concentración de 1T 10 4 Células/cm2 en placas de 24 pocillos. A los 8 días, las células se trataron con 1,25D durante 12h, 24h y 48h. También se trataron células con alcohol etílico al 0,1% como control. Se recogieron las muestras de liquido sobrenadante y se determinó la concentración de IL6 con ensayo de inmuno absorción ligado a enzimas ELISA. Discusión: Se obsevo que se inhibió significativamente la expresión de IL8 en hPDLC de una manera dependiente de la dosis y del tiempo, sobre todo a las 48h, donde también redujo el nivel medio de ARNm.

Scene 19 (5m 29s)

Objetivo: Determinar la expresion de la proteina IL6 en hPDLC tratados con 1,25D combinado con P.gingivalis w83.

Metodología:   Las hPDLC del paso 4 se sembraron a una concentración de 1T 10 4 Células/cm2 en placas de 24 pocillos. A los 8 días, las células se trataron con 1,25D durante 24 h y luego fueron estimuladas con P.gingivalis durante 12 y 24 h, también se trataron células con 0,1% de alcohol etílico combinado con P.gingivalis .(MOI de 100). Se incluyeron 6 pozos en cada grupo se recogieron las muestras del liquido sobrenadante y se determino la concentración de proteína IL6 con enzimas ELISA. El nivel de ARNm de IL6 se midio mediante RT-PCR en tiempo real. Discusión: Se obsevo que la 1,25D no influyo en la expresion de IL6 y el ARNm en las hPDLC bajo el tratamiento de P.gingivalis.

Scene 20 (6m 14s)

Objetivo: Determinar la expresion de la proteina IL6 en hPDLC tratados con 1,25D combinado con P.gingivalis w83.

Metodología:  Las hPDLC del paso 4 se sembraron a una concentración de 1T 10 4 Células/cm2 en placas de 24 pocillos. A los 8 días, las células se trataron con 1,25D durante 24 h y luego fueron estimuladas con P.gingivalis durante 12 y 24 h, también se trataron células con 0,1% de alcohol etílico combinado con P.gingivalis .(MOI de 100). Se incluyeron 6 pozos en cada grupo se recogieron las muestras del liquido sobrenadante y se determino la concentración de proteína IL6 con enzimas ELISA. El nivel de ARNm de IL6 se midio mediante RT-PCR en tiempo real.