Imunidade Inata. Casos clínicos Método: PBL. 

Scene 1

Caso clínico – 1. Uma menina de 13 anos furou as orelhas para colocação de brincos. Embora tenha sido instruída a limpar a área em redor dos brincos com álcool, não o fez nos primeiros 2 dias por esquecimento. No terceiro dia, apercebeu-se que a área em torno de um lóbulo da orelha estava vermelha e ligeiramente inchada. a) Que ramo do sistema imunológico é provavelmente responsável pelos sintomas descritos? b) Que tipo de células seriam provavelmente encontradas no tecido se fosse realizada uma biópsia? Porque? c) Distinga inflamação de infeção. 

Scene 2

Uma menina de 13 anos furou as orelhas para colocação de brincos. Embora tenha sido instruída a limpar a área em redor dos brincos com álcool, não o fez nos primeiros 2 dias por esquecimento. No terceiro dia, apercebeu-se que a área em torno de um lóbulo da orelha estava vermelha e ligeiramente inchada. a) Que ramo do sistema imunológico é provavelmente responsável pelos sintomas descritos? b) Que tipo de células seriam provavelmente encontradas no tecido se fosse realizada uma biópsia? Porque? c) Distinga inflamação de infeção

Respostas. a. Como o inchaço surgiu num prazo de 2 dias, é provavelmente causada por uma resposta imune inata. A resposta imune adaptativa leva mais tempo para se desenvolver porque depende do reconhecimento de um antigénio específico pelos linfócitos. Edema e rubor nos tecidos são causados por neutrófilos deixando a corrente sanguínea por meio de diapedese em resposta à presença de bactérias.. 

Scene 3

a.  Como o inchaço surgiu num prazo de 2 dias, é provavelmente causada por uma resposta imune inata.  A resposta imune adaptativa leva mais tempo para se desenvolver porque depende do reconhecimento de um antigénio específico pelos linfócitos.  Edema e rubor nos tecidos são causados por  neutrófilos  deixando a corrente sanguínea por meio de diapedese em resposta à presença de bactérias.

Differences between innate and adaptive immunity | innate vs adaptive  immunity | - YouTube

Respostas. b. Pode haver macrófagos , neutrófilos e células dendríticas presentes, mas como é recente o predomínio é de neutrófilos. 

Scene 4

b. Pode haver  macrófagos ,  neutrófilos  e  células dendríticas  presentes, mas como é recente o predomínio é de  neutrófilos

Innate and Adaptive Immunity - American Society for Radiation Oncology  (ASTRO) - American Society for Radiation Oncology (ASTRO)

Inflamação. c. É a resposta do hospedeiro a estímulos inflamatórios de diversa natureza: Infeciosos Químicos Físicos, como trauma ou exposição à radiação Caracteriza-se pelas manifestações cardinais de Celso: calor, rubor (eritema), tumor (edema) e dor (nas articulações – impotência funcional) Tipos: Aguda/simples : resolve-se com a remoção do estimulo inflamatório e repara os tecidos. Predomínio de neutrófilos . Ocorre rapidamente, antes da imunidade adaptativa Cronica : prolongada, mantem-se mesmo apos remoção do estimulo. Causa lesão tecidular e perda da função. Predomínio de macrófagos, células dendríticas e linfócitos (células mononucleares). 

Scene 5

c.  É a resposta do hospedeiro a estímulos inflamatórios de diversa natureza: Infeciosos Químicos Físicos, como trauma ou exposição à radiação Caracteriza-se pelas manifestações cardinais de Celso: calor, rubor (eritema), tumor (edema) e dor (nas articulações – impotência funcional) Tipos: Aguda/simples : resolve-se com a remoção do estimulo inflamatório e repara os tecidos. Predomínio de  neutrófilos . Ocorre rapidamente, antes da imunidade adaptativa  Cronica : prolongada, mantem-se mesmo apos remoção do estimulo. Causa lesão tecidular e perda da função. Predomínio de  macrófagos, células dendríticas e linfócitos  (células mononucleares)

Inflamação. 1. libertação de mediadores como a histamina pelos mastócitos e C5a que causam vasodilatação. Resultado aumento do fluxo sanguíneo – rubor e calor 2. aumento da permeabilidade vascular (por contração das células endoteliais) - ↑ liquido espaço intersticial: edema e dor 3. migração dos leucócitos, sb neutrófilos dos capilares para os tecidos por DIAPEDESE, em resposta às PFA, quimiocinas e citocinas . Os neutrófilos são mobilizados em 30-60 min e pode durar 24-48h 4. migração de macrófagos e células dendríticas 5. as PFA+ estimulam a fagocitose pelo macrófagos, neutrófilos e células dendríticas. 

Scene 6

1. libertação de mediadores como a histamina pelos mastócitos e C5a que causam vasodilatação. Resultado aumento do fluxo sanguíneo – rubor e calor 2. aumento da permeabilidade vascular (por contração das células endoteliais) -  ↑ liquido espaço intersticial: edema e dor  3. migração dos leucócitos,  sb  neutrófilos dos capilares para os tecidos por DIAPEDESE, em resposta às PFA,  quimiocinas  e  citocinas . Os neutrófilos são mobilizados em 30-60 min e pode durar 24-48h 4. migração de macrófagos e células dendríticas  5. as PFA+ estimulam a fagocitose pelo macrófagos, neutrófilos e células dendríticas

4
. Resident macrophages and mast cells at the
site of infection rolcasc chemokines that cause
vasodilation and induce selectins.
2.
Selectins loosely bind circulating leukocytes
and causc thcm to roll along thc vascular wall.
3.
Chemokine-induced integrins on the leukocytes
bind firmly to the endothelial cells
4.
Integrins enable the leukocytes to crawl between
endothelial cells (diapedesis).
5.
Leukocytes then tollov.' the chemokine
concentration gradient to the site of infection
(chomotaxi$).
Site of
infection

Leukocyte Extravasation Tight binding state int"rin cytokines (eg„ TNF and o Blood vessel lumen Interstitium @ Lineage Higwaffinity 1 Chem'kines 000 0 000 0 Diapedesis and Migration PEC AM-I Moises Dominguez. 

Scene 7

Leukocyte Extravasation
Tight binding
state int"rin
cytokines (eg„ TNF and
o
Blood vessel lumen
Interstitium
@ Lineage
Higwaffinity 1
Chem'kines
000
0 000 0
Diapedesis and Migration
PEC AM-I
Moises Dominguez

Marginação Rolamento Ativação Adesão Diapedése Quimiotaxia

Integrinas – expressas à superfície dos fagócitos  “IF” Selectinas  – expressa à superfície das células endoteliais  “SE”

Fagocitose. Etapas 1. contacto entre o leucócito e célula estranha 2. emissão de pseudópodes 3. formação do fagossoma 4. fusão dos lisossomas com os fagossomas 5. formação do fagolisossoma 6. digestão dos microrganismos pelas enzimas hidrolíticas dos lisossomas ( lisozima, mieloperoxidase , e outras enzimas proteolíticas) 7. Libertação dos resíduos para o espaço extracelular por exocitose Processos de eliminação: Via O2-dependente Via O2-independente. 

Scene 8

Etapas 1. contacto entre o leucócito e célula estranha  2. emissão de pseudópodes 3. formação do fagossoma 4. fusão dos lisossomas com os fagossomas 5. formação do  fagolisossoma   6. digestão dos microrganismos pelas enzimas hidrolíticas dos lisossomas ( lisozima,  mieloperoxidase , e outras enzimas proteolíticas)  7. Libertação dos resíduos para o espaço extracelular por exocitose   Processos de eliminação: Via O2-dependente Via O2-independente

Fagocitose – vias. Via O2 – dependente Formação de radicais livres de O2 Via O2-independente Ativação de defensinas e catepsina G. 

Scene 9

Via O2 – dependente Formação de radicais livres de O2 Via O2-independente  Ativação de  defensinas  e  catepsina  G

Cytoplasm
Pentose-5-P
HMP shunt
Start here
Glucose
Anti-
microbial
enzyrnB
NADPH
NOCO
NADP-
202
ATP ADP
Phagolysonrnc
.OH - OH
SD
MPO
H202 a- —>OCI- I H20
Pathogcn
MPO
FIGURE 2-6 Creation of oxygen radicals in the phagocytic cell. The hexose monophosphate (HMP) shunt reduces
NADP+ to NADPH. NADPH reduces oxygen to superoxide (202-) when the NADPH oxidase complex (NOC) is
assembled in the membrane of the phagolysosome. Superoxide dismutase (SD) catalyzes the conversion of
superoxide to hydrogen peroxide (H202). Myeloperoxidase (MPO) catalyzes the formation of hypochlorite (OCIO,
a very powerful oxidizing agent. Hydroxyl radicals (•OH), which are also powerful oxidizing agents, may also be
formed if iron ions are present.

Neutrófilo. Ou PMN neutrófilo Adultos: 50-70% leucócitos periféricos Núcleo com 2 a 5 lobos (segmentado) Principal função: fagocitose e NETosis Muitos grânulos (200/células) – que sofrem desgranulação na fagocitose. 

Scene 10

Ou PMN neutrófilo  Adultos: 50-70% leucócitos periféricos Núcleo com 2 a 5 lobos (segmentado) Principal função: fagocitose  e  NETosis   Muitos grânulos (200/células) – que sofrem desgranulação na fagocitose

Uma imagem com texto Descri o gerada automaticamente

Neutrófilo. Sofrem autólise durante a sua atividade – células Kamikaze ½ dos neutrófilos do sangue estão próximos das paredes dos vasos – pool marginal (a outra ½ circula no sangue por 1-2d – pool circulante). Essa marginação permite a diapedese (movimento através da parede dos vasos) e ocorre por fatores quimiotacicos (quimiotaxia) Neutrofilia – aumento dos neutrófilos do sangue – causas (infeção sistémica ou local grave): Desvio do pool marginal para o circulante Aumento do fluxo de neutrófilos da medula óssea Aumento da produção pela medula óssea- leucemia Neutropenia – diminuição dos neutrófilos do sangue – causas: Quimioterapia Radioterapia Aplasia medular HIV LES, etc. 

Scene 11

Sofrem autólise durante a sua atividade – células  Kamikaze  ½ dos neutrófilos do sangue estão próximos das paredes dos vasos – pool marginal  (a outra ½ circula no sangue por 1-2d – pool circulante). Essa marginação permite a diapedese (movimento através da parede dos vasos) e ocorre por fatores  quimiotacicos  (quimiotaxia)  Neutrofilia  – aumento dos neutrófilos do sangue – causas (infeção sistémica ou local grave): Desvio do pool marginal para o circulante Aumento do fluxo de neutrófilos da medula óssea Aumento da produção pela medula óssea- leucemia Neutropenia – diminuição dos neutrófilos do sangue – causas: Quimioterapia Radioterapia Aplasia medular HIV LES,  etc

Neutrófilos: fagocitose. azurophilic Fc receptor lysosome antibody pseudopod residual digestion exocytosis. 

Scene 12

azurophilic
Fc receptor
lysosome
antibody
pseudopod
residual
digestion
exocytosis

Monócitos. As maiores células do sangue periférico 2-10% leucócitos periféricos. Circulam por 30h e migram para os tecidos e tornam-se macrófagos Núcleo irregular em forma de ferradura que ocupa quase ½ da célula O citoplasma abundante cora de cinzenta e tem aspeto de vidro fosco pela presença de grânulos “ dustlike ” que são de 2 tipos: Uns contêm: peroxidase, fosfatase acida, arilsulfatase (semelhantes aos lisossomas dos neutrófilos) Outros contêm: β- glucuronidase , lisozima, lípase Macrófagos Todos derivam dos monócitos. No tecidos sofrem diferenciação e dividem-se. Semi-vida : meses Na sua transição ficam maiores mas perdem a peroxidase. Menor capacidade na fagocitose que os neutrófilos porque se movem lentamente Papel na imunidade: Inata: fagocitose, destruição microbiana (ficam ativados no contacto com agentes patogénicos e quando são estimulados pelas citocinas produzidas pelos linfócitos T), atividade anti-tumoral , erradicação de patógenos intracelulares e secreção de mediadores Adaptava: são APC (Células Apresentadoras de Ag ) – apresentam Ag fagocitados aos linfócitos T Têm designações diferentes consoante os tecidos que ocupam. 

Scene 13

As maiores células do sangue periférico 2-10% leucócitos periféricos. Circulam por 30h e migram para os tecidos e tornam-se macrófagos  Núcleo irregular em forma de ferradura que ocupa quase ½ da célula  O citoplasma abundante cora de cinzenta e tem aspeto de vidro fosco pela presença de grânulos “ dustlike ” que são de 2 tipos: Uns contêm: peroxidase,  fosfatase  acida,  arilsulfatase  (semelhantes aos lisossomas dos neutrófilos) Outros contêm:  β-  glucuronidase , lisozima, lípase Macrófagos  Todos derivam dos monócitos. No tecidos sofrem diferenciação e dividem-se.  Semi-vida : meses  Na sua transição ficam maiores mas perdem a peroxidase. Menor capacidade na fagocitose que os neutrófilos porque se movem lentamente   Papel na imunidade: Inata: fagocitose, destruição microbiana (ficam ativados no contacto com agentes patogénicos e quando são estimulados pelas  citocinas  produzidas pelos linfócitos T), atividade  anti-tumoral , erradicação de  patógenos  intracelulares e secreção de mediadores Adaptava: são APC (Células Apresentadoras de  Ag ) – apresentam  Ag   fagocitados  aos linfócitos T  Têm designações diferentes consoante os tecidos que ocupam

A opsonina – PCR. Assim designada por ter sido identificada a sua ligação ao polissacárido C do pneumococos ( Tillet e Francis- 1930) Atualmente é reconhecida como tendo um papel mais abrangente: PM 118 000-144 000 daltons ; pentamerica (da família das pentraxinas ) Atua de forma ≈ Ac , como opsonina: Reconhece a fosfocolina (principal substrato), peptidoglicanos , proteínas ribonucleares e carbohidratos nas bactérias, fungos e parasitas (e algumas células mortas) Considerado uma forma primitiva da Ac não especifico Semivida: 18h; eleva-se rapidamente, por vezes 100x-1000x em 4-6h apos infeção, cirurgia, ou outras formas de trauma; pico em 48h, diminui rapidamente quando cessa o estimulo inflamatório – mais útil indicador da inflamação aguda Participa na aglutinação, precipitação e ativação do complemento (via clássica) Reconhecida pelos recetores específicos dos monócitos/macrófagos e neutrófilos, promove a FAGOCITOSE. 

Scene 14

Assim designada por ter sido identificada a sua ligação ao polissacárido C do pneumococos ( Tillet  e Francis- 1930) Atualmente é reconhecida como tendo um papel mais abrangente: PM 118 000-144 000  daltons ;  pentamerica  (da família das  pentraxinas ) Atua de forma  ≈  Ac , como opsonina: Reconhece a  fosfocolina  (principal substrato),  peptidoglicanos , proteínas  ribonucleares  e  carbohidratos  nas bactérias, fungos e parasitas (e algumas células mortas) Considerado uma forma primitiva da  Ac  não especifico Semivida: 18h; eleva-se rapidamente, por vezes 100x-1000x em 4-6h apos infeção, cirurgia, ou outras formas de trauma; pico em 48h, diminui rapidamente quando cessa o estimulo inflamatório – mais útil indicador da inflamação aguda   Participa na aglutinação, precipitação e ativação do complemento (via clássica) Reconhecida pelos recetores específicos dos monócitos/macrófagos e neutrófilos, promove a FAGOCITOSE

c) Distinga inflamação de infeção. Inflamação ≠ Infeção Inflamação – resposta do hospedeiro a vários estímulos (químicos, infeciosas e físicos), assim sendo a infeção é apenas uma causa de inflamação. 

Scene 15

Inflamação  ≠ Infeção  Inflamação – resposta do hospedeiro a vários estímulos (químicos, infeciosas e físicos), assim sendo a infeção é  apenas  uma causa de inflamação

Caso clínico – 2. Uma estudante universitária de 20 anos foi à urgência com sintomas de mal-estar, fadiga, dor de garganta e febre ligeira. Um hemograma completo foi realizado e tanto a contagem de eritrócitos quanto de leucócitos estavam dentro dos limites normais. Uma contagem normal de leucócitos descartou a possibilidade de uma infeção bacteriana. Foi realizado um teste rápido para pesquisa de Streptococcus pyogenes na orofaringe, que foi negativo. Um teste de aglutinação em lâmina para mononucleose infeciosa foi indeterminado (nem positivo ou negativo), enquanto um teste de aglutinação em lâmina para a PCR foi positivo. Os resultados de uma determinação semi-quantitativa de PCR indicaram um nível aumentado de aproximadamente 20 mg/ dL . A estudante foi instruída a regressar alguns dias depois para repetir o teste Monospot . a) Que situações podem induzir um aumento da PCR? Qual a sua função? b) Um aumento da PCR seria consistente com a possibilidade de mononucleose infeciosa? c) Que outras proteínas de fase aguda conhece? Como as pode classificar? d) Como faz o doseamento da PCR e) O que é e para que serve o teste Monospot. 

Scene 16

Uma estudante universitária de 20 anos foi à urgência com sintomas de mal-estar, fadiga, dor de garganta e febre ligeira. Um hemograma completo foi realizado e tanto a contagem de eritrócitos quanto de leucócitos estavam dentro dos limites normais. Uma contagem normal de leucócitos descartou a possibilidade de uma infeção bacteriana. Foi realizado um teste rápido para pesquisa de  Streptococcus   pyogenes  na orofaringe, que foi negativo. Um teste de aglutinação em lâmina para mononucleose infeciosa foi indeterminado (nem positivo ou negativo), enquanto um teste de aglutinação em lâmina para a PCR foi positivo. Os resultados de uma determinação  semi-quantitativa  de PCR indicaram um nível aumentado de aproximadamente 20 mg/ dL . A estudante foi instruída a regressar alguns dias depois para repetir o teste  Monospot . a) Que situações podem induzir um aumento da PCR? Qual a sua função?  b) Um aumento da PCR seria consistente com a possibilidade de mononucleose infeciosa? c) Que outras proteínas de fase aguda conhece? Como as pode classificar? d) Como faz o doseamento da PCR e) O que é e para que serve o teste  Monospot

Respostas. a. A PCR é um dos primeiros indicadores de uma possível infeção. Os níveis também aumentam em caso de neoplasia maligna, ataque cardíaco ou traumatismos no corpo. Se a infeção tem origem bacteriana, é expectável que ocorra um aumento no número de glóbulos brancos. Este aumento ocorre principalmente pelo recrutamento de neutrófilos para ajudar a combater o organismo invasor. No entanto, se a infeção é causada por um vírus, normalmente não há aumento na contagem de neutrofilos (pode haver aumento do número de linfócitos – linfocitose, com linfócitos atípicos (>20% linfócitos) Sendo uma proteína de fase aguda, os níveis de PCR aumentam significativamente num intervalo de 24 horas, muito antes que qualquer anticorpo específico possa ser detetado. b. Um aumento da PCR provavelmente seria observado se a estudante apresentasse infeção por EBV (mononucleose infeciosa), uma infeção viral. No entanto, a PCR não indica especificamente que tipo de infeção viral ou bacteriana pode estar presente. Os sintomas são compatíveis com a possibilidade de mononucleose, mas outras patologias não podem ser descartadas. Repetir o teste monospot após alguns dias permitirá tempo suficiente para que um nível detetável de anticorpos se forme e o diagnóstico possa ser confirmado.. 

Scene 17

a. A PCR é um dos primeiros indicadores de uma possível infeção. Os níveis também aumentam em caso de neoplasia maligna, ataque cardíaco ou traumatismos no corpo. Se a infeção tem origem bacteriana, é expectável que ocorra um aumento no número de glóbulos brancos. Este aumento ocorre principalmente pelo recrutamento de neutrófilos para ajudar a combater o organismo invasor. No entanto, se a infeção é causada por um vírus, normalmente não há aumento na contagem de  neutrofilos  (pode haver aumento do número de linfócitos –  linfocitose, com linfócitos atípicos (>20% linfócitos)  Sendo uma proteína de fase aguda, os níveis de PCR aumentam significativamente num intervalo de 24 horas, muito antes que qualquer anticorpo específico possa ser detetado. b. Um aumento da PCR provavelmente seria observado se a estudante apresentasse infeção por EBV (mononucleose infeciosa), uma infeção viral. No entanto, a PCR não indica especificamente que tipo de infeção viral ou bacteriana pode estar presente. Os sintomas são compatíveis com a possibilidade de mononucleose, mas outras patologias não podem ser descartadas. Repetir o teste  monospot  após alguns dias permitirá tempo suficiente para que um nível detetável de anticorpos se forme e o diagnóstico possa ser  confirmado.

Qual a função da PCR?. Estrutura pentamerica – 5 subunidades É opsonina – liga-se à fosfocolina na membrana dos microrganismos e a recetores específicos dos monócitos/macrófagos e neutrófilos ( fagocitos ) Ativa o complemento – via clássica. 

Scene 18

Estrutura  pentamerica  – 5 subunidades É opsonina – liga-se à  fosfocolina  na membrana dos microrganismos e a recetores específicos dos monócitos/macrófagos e neutrófilos ( fagocitos ) Ativa o complemento – via clássica

CR3
FIGURE 7—9 Role of C3b in opsonization. C3b, antibody, and
C-reactive protein are all important opsonins that coat antigens and
accelerate phagocytosis. Receptors for C3b (CR3), antibody (FCR),
and C-reactive protein (CRP-R) on the phagocytic cell membrane
bind the opsonins and pull the membrane around to envelop the
antigen.

Outras opsoninas: componentes do complemento e anticorpos

C) que outras proteínas de fase aguda conhece?. Table 3-2 PROTEIN Characteristics of Acute-Phase Reactants C-reactive protein Serum amyloid A Alpharantitrypsin Fibrinogen Haptoglobin Ceruloplasmin Complement C3 RESPONSE TIME (HR) 24 24 24 24 48—72 48—72 NORMAL CONCENTRATION (MG/DL) 0.5 5 200-400 200-400 40-290 20-40 60—140 INCREASE 1 ooox 1 ooox 2-rox 2-5x 2-10X FUNCTION Opsonization, complement activation Activates monocytes and macrophages Protease inhibitor Clot formation Binds hemoglobin Binds copper and oxidizes iron Opsonization, lysis. 

Scene 19

C)  que outras proteínas de fase aguda conhece?

Table 3-2
PROTEIN
Characteristics of Acute-Phase Reactants
C-reactive protein
Serum amyloid A
Alpharantitrypsin
Fibrinogen
Haptoglobin
Ceruloplasmin
Complement C3
RESPONSE
TIME (HR)
24
24
24
24
48—72
48—72
NORMAL
CONCENTRATION
(MG/DL)
0.5
5
200-400
200-400
40-290
20-40
60—140
INCREASE
1 ooox
1 ooox
2-rox
2-5x
2-10X
FUNCTION
Opsonization, complement activation
Activates monocytes and macrophages
Protease inhibitor
Clot formation
Binds hemoglobin
Binds copper and oxidizes iron
Opsonization, lysis

c)Como as pode classificar?. Proteínas sérias associadas ao inicio de qualquer infeção ou lesão tecidular Podem aumentar (+) ou diminuir (-) (estas PFA -: albumina, transferrina , Pre -albumina e RBP) Podem ser: pro-inflamatória: PCR , MBL, Proteína surfactante A(SP-A) e D (SP-D); L-, H- e M- Ficolinas ; C3a, C4a, C5a, etc anti-inflamatória: Amiloide Serica A (SAA); α 2-Macroglobulina; α 1-anti-tripsina, ceruloplasmina , fibrinogénio, haptoglobina Geralmente produzidas no fígado. 

Scene 20

Proteínas sérias associadas ao inicio de qualquer infeção ou lesão tecidular Podem aumentar (+) ou diminuir (-) (estas PFA -: albumina,  transferrina ,  Pre -albumina e RBP) Podem ser:  pro-inflamatória:  PCR , MBL, Proteína  surfactante  A(SP-A) e D (SP-D); L-, H- e M- Ficolinas ; C3a, C4a, C5a,  etc    anti-inflamatória: Amiloide  Serica  A (SAA);  α 2-Macroglobulina;  α 1-anti-tripsina,  ceruloplasmina , fibrinogénio, haptoglobina Geralmente produzidas no fígado

Patogenia da infeção EBV. Infeção inicial pelo EBV – orofaringe – infecta Células epiteliais - o EBV liga-se a β 1 integrinas na sua superfície Linfócitos B – o EBV liga-se ao CD 21 – estes linfócitos ativam-se de forma policlonal produzindo ac heterofilos Assintomática - Crianças Quadro de MI – adolescentes e adultos (tríade: febre, linfadenopatia e odinofagia - 2-4 semanas) mas fadiga, mialgias podem persistir por meses Tratamento: sintomático ( NÃO antibióticos ! É viral) Se tratado com amoxicilina. 

Scene 21

Infeção inicial pelo  EBV  – orofaringe – infecta  Células epiteliais - o  EBV  liga-se a  β 1  integrinas na sua superfície Linfócitos B – o EBV liga-se ao CD 21 – estes linfócitos ativam-se de forma  policlonal  produzindo  ac  heterofilos  Assintomática - Crianças  Quadro de MI – adolescentes e adultos (tríade: febre,  linfadenopatia  e odinofagia - 2-4 semanas) mas fadiga, mialgias podem persistir por meses  Tratamento: sintomático ( NÃO antibióticos ! É viral) Se tratado com amoxicilina

Infectious Mononucleosis with skin rash after
treatment with amoxicillin

d) como faz o doseamento da PCR. https://youtu.be/zDyETxcAO0Y. 

Scene 22

Aglutinaqäo em Iåtex
Particulas de låtex como transportadoras de antigénios ou anticorpos
latex particles coated with
antibodies specific to CRP
Specific antibody
Latex beads
Particle agglutination
Agglutination
Fig. 9.1
Patient Serum containing CRP
The principle of the CRP latex agglutination test

Aglutinação indireta (recurso a partículas inertes ( ex  latex) reversa ( porque os anticorpos se encontram imobilizados em partículas inertes)

Aglutinaqäo indireta e indirecta reversa (B) Aglutinacäo indireta (ou passiva) Aglutinacäo indireta (ou passiva) reversa Carrier particles Coated mixed wih partdes sample soluble antgen Agglutination Carrier particbs Coated mixed with particles reagent antibody Patient sample Aggutination FIGURE 10-12 Passive and reverse passive agglutination. (A) Passive agglutination. Antigen is attached to the carrier particle; agglutination occurs if patient antibody is present. (B) Reverse passive agglutination. Antibody is attached to the carrier particle; agglutination occurs if patient antigen is present.. 

Scene 23

Aglutinaqäo indireta e indirecta reversa
(B)
Aglutinacäo indireta (ou passiva)
Aglutinacäo indireta (ou passiva)
reversa
Carrier particles Coated
mixed wih partdes sample
soluble antgen
Agglutination
Carrier particbs Coated
mixed with particles
reagent antibody
Patient
sample
Aggutination
FIGURE 10-12 Passive and reverse passive agglutination. (A) Passive agglutination. Antigen is attached to the
carrier particle; agglutination occurs if patient antibody is present. (B) Reverse passive agglutination. Antibody is
attached to the carrier particle; agglutination occurs if patient antigen is present.

Resumo - reacöes de aglutinaqäo Study Guide: Comparison of Agglutination Reactions TYPE OF REACTION Direct agglutination Indirect (passive) agglutination Reverse passive Agglutination inhibition Hemagglutination inhibition PRINCIPLE Patient serum is reacted with antigen that is naturally found on a particle. Patient sample is reacted with particles coated with antigens not normally found on their surfaces. Patient sample is reacted with particles that are coated with reagent antibody. Haptens are attached to carrier particles. Particles compete with patient antigens for a limited number of antibody sites. RBCs spontaneously agglutinate if viral particles are present. RESULTS Agglutination indicates the presence of patient antibody to a natural antigen. Agglutination indicates the presence of patient antibody to an artificially attached antigen. Agglutination indicates the presence of specific antigen in the patient sample. Lack of agglutination is a positive test, indicating the presence of antigen in the patient sample. Lack of agglutination is a positive test, indicating the presence of patient antibody.. 

Scene 24

Resumo - reacöes de aglutinaqäo
Study Guide: Comparison of Agglutination Reactions
TYPE OF
REACTION
Direct
agglutination
Indirect (passive)
agglutination
Reverse passive
Agglutination
inhibition
Hemagglutination
inhibition
PRINCIPLE
Patient serum is reacted with antigen that is
naturally found on a particle.
Patient sample is reacted with particles coated
with antigens not normally found on their
surfaces.
Patient sample is reacted with particles that are
coated with reagent antibody.
Haptens are attached to carrier particles. Particles
compete with patient antigens for a limited
number of antibody sites.
RBCs spontaneously agglutinate if viral particles
are present.
RESULTS
Agglutination indicates the presence of
patient antibody to a natural antigen.
Agglutination indicates the presence of
patient antibody to an artificially
attached antigen.
Agglutination indicates the presence of
specific antigen in the patient sample.
Lack of agglutination is a positive test,
indicating the presence of antigen in
the patient sample.
Lack of agglutination is a positive test,
indicating the presence of patient
antibody.

e) O que é e para que serve o teste Monospot. Anticorpos heterófilos – ac capazes de reagir com Ag semelhantes de ≥ 2 espécies Os ac heterofilos ( ≠ dos ac específicos) da Mononucleose Infeciosa (MI) são IgM produzidos na ativação policlonal B e são capazes de reagir com GV de cavalo, ovelha e gado bovino Presentes em 40% dos pacientes com MI – 1ª semana de doença Presentes em 80-90% dos pacientes com MI- 3ª semana de doença Geralmente desaparecem nos 3 meses apos o inicio da infeção F -: 10 % adultos e 50% < 4 anos F+: linfoma, hepatite viral, malaria, doenças autoimunes (não são tão sensíveis e específicos como os anticorpos específicos) Como surgem na fase aguda da infeção – rastreio para pacientes suspeitos de MI. 

Scene 25

e) O que é e para que serve o teste  Monospot

Anticorpos heterófilos –  ac  capazes de reagir com  Ag  semelhantes de ≥ 2 espécies  Os  ac  heterofilos ( ≠ dos  ac  específicos)  da Mononucleose Infeciosa (MI) são  IgM  produzidos na ativação  policlonal  B e são capazes de reagir com GV de cavalo, ovelha e gado bovino   Presentes em 40% dos pacientes com MI – 1ª semana de doença Presentes em 80-90% dos pacientes com MI- 3ª semana de doença Geralmente desaparecem nos 3 meses apos o inicio da infeção F -: 10 % adultos e 50% < 4 anos F+: linfoma, hepatite viral, malaria, doenças autoimunes  (não são tão sensíveis e específicos como os anticorpos específicos)  Como surgem na fase aguda da infeção – rastreio para pacientes suspeitos de MI

e) O que é e para que serve o teste Monospot. Teste monospot Teste de deteção de ac heterofilos realizada em lamina Técnica de aglutinação DIRECTA A mistura do soro com ag do rim do porquinho da India mantinham a capacidade de aglutinar GV do cavalo A mistura do soro com GV bovinos perde capacidade de aglutinar GV de cavalo ( porque os ac heterofilos ligavam-se aos GV de bovinos) (permite distinguir os ac heterofilos da MI de outros ac heterofilos produzidos por outras doenças) Atualmente estes métodos foram substituídos por testes mais sensíveis: Aglutinação Imunocromatografia (https://youtu.be/bXNh104_WQg) que utilizam estratos purificados de GV bovinos. 

Scene 26

Teste  monospot   Teste de deteção de  ac  heterofilos realizada em lamina Técnica de aglutinação DIRECTA A mistura do soro com  ag  do rim do porquinho da India mantinham a capacidade de aglutinar GV do cavalo A mistura do soro com GV bovinos perde capacidade de aglutinar GV de cavalo ( porque os  ac  heterofilos ligavam-se aos GV de bovinos)  (permite distinguir os  ac  heterofilos da MI de outros  ac  heterofilos produzidos por outras doenças)  Atualmente estes métodos foram substituídos por testes mais sensíveis: Aglutinação Imunocromatografia  (https://youtu.be/bXNh104_WQg)  que utilizam estratos purificados de GV bovinos

Curiosidades…. FIGURE 23—7 Atypical lymphocytes from a patient with infectious mononucleosis. Note the variation in size, nuclear:cytoplasmic ratio, and chromatin (From Harmening D. Clinical Hematology and Fundamentals of Hemostasis. 5th ed. Philadelphia, PA F. A. Davis; 2009). 

Scene 27

FIGURE 23—7 Atypical lymphocytes from a patient with infectious
mononucleosis. Note the variation in size, nuclear:cytoplasmic ratio,
and chromatin (From Harmening D. Clinical Hematology
and Fundamentals of Hemostasis. 5th ed. Philadelphia, PA F. A. Davis;
2009)

Epstein-Barr Virus Antigens
EARLY ACUTE
PHASE
EA-R (early
antigen
restricted)
(early
antigen
diffuse)
LATE PHASE
VCA (viral cap-
sid antigen)
MA (membrane
antigen)
LATENT PHASE
EBNA (EBV nuclear
antigens): EBNA-I,
EBNA-2. EBNAO
(3a). EBNA4 (3b),
EBNA-5 (LR),
EBNA-6 (3c)
Latent membrane
proteins (LMP-I ,
LMP-2A, LMP-2B)

Table 23-3
Condition
Uninfected
Acute 1M
Serological Responses Of patients With Epstein-Barr Virus-Associated Diseases
ANTI.VCA ANTI.EA
IgM IgG
IgA EAD EAR ANTIÆBNA HETEROPHILE ANTIBODY
Convalescent 1M
past infection 1M
Chronic active infection 1M
Post-transplant lymphoproliferative disease —
Burkitt's lymphoma
Nasopharyngeal carcinoma
EA-D EAR 'M VCA via/ capsid
Adapted from Straus SE er at Epstein-garr virus tnrectOns.' t»ö/cgy. path.»enesis. and manaæment. Ann Intern Med. WS: ' with permissecn.

VIRUS
Epstein-Barr virus
CANCER ASSOCIATIONS
Burkitt lymphoma
Hodgkin lymphoma
Leiomyosarcomas
Post-transplant lymphoprolif-
erative disease
Nasopharyngeal carcinoma

Linfocitos  atípicos- linfócitos  Tc  ativados

Ac  específicos – produzidos depois dos  Ac  heterofilos

Linfoma de Burkitt. O linfoma de Burkitt é um linfoma não Hodgkin agressivo de células B que ocorre em crianças e adultos. Existem: formas endêmicas (africana) costuma se manifestar como aumento da mandíbula ou dos ossos da face. esporádicas (não africana) tumor abdominal relacionadas com a imunodeficiência.. 

Scene 28

O linfoma de  Burkitt  é um linfoma não  Hodgkin  agressivo de células B que ocorre em crianças e adultos. Existem: formas endêmicas (africana) costuma se manifestar como aumento da mandíbula ou dos ossos da face. esporádicas (não africana) tumor abdominal  relacionadas com a imunodeficiência.

Leucoplasia pilosa. A leucoplasia pilosa oral é uma manifestação precoce da infeção VIH em adultos. As placas brancas no bordo da língua e ocasionalmente na mucosa oral contem DNA do EBV.. 

Scene 29

A leucoplasia pilosa oral é uma manifestação precoce da infeção VIH em adultos. As placas brancas no bordo da língua e ocasionalmente na mucosa oral contem DNA do EBV.

FIGURE 189-3 Oral hairy leukoplakia often presents as white plaques on the
lateral surface of the tongue and is associated with Epstein-Barr virus infection.

Caso clínico - 3. Um homem de 45 anos foi ao médico para realizar um check-up anual. Embora estivesse um pouco acima do peso, os resultados laboratoriais indicaram que tanto o colesterol total como o colesterol HDL estavam dentro dos limites normais. Os níveis de fibrinogénio no plasma são de 450 mg/ dL (Valor normal 150-370 ) e o doseamento de PCR é 3,5 mg/ dL (Valor normal< 1mg / dL ). O exame físico é perfeitamente normal. O médico advertiu o utente que ele pode estar em risco de sofrer um futuro ataque cardíaco e aconselhou-o a realizar exercício físico regulamente, associado a uma alimentação e dieta saudável, com baixo teor de gordura. No entanto, a esposa do utente disse-lhe que se apresentasse níveis de colesterol normais ele não tinha nada com que se preocupar a) Quem está correto? Explique a sua resposta. b) Porque o fibrinogénio encontra-se também elevado ? c) Comente a frase – A aterosclerose é uma condição inflamatória d) Na determinação desta PCR de alta sensibilidade, qual o método utilizado?. 

Scene 30

Um homem de 45 anos foi ao médico para realizar um check-up anual. Embora estivesse um pouco acima do peso, os resultados laboratoriais indicaram que tanto o colesterol total como o colesterol HDL estavam dentro dos limites normais. Os níveis de fibrinogénio no plasma são de 450 mg/ dL  (Valor normal 150-370 ) e o doseamento de PCR é 3,5 mg/ dL  (Valor normal< 1mg / dL ). O exame físico é perfeitamente normal. O médico advertiu o utente que ele pode estar em risco de sofrer um futuro ataque cardíaco e aconselhou-o a realizar exercício físico regulamente, associado a uma alimentação e dieta saudável, com baixo teor de gordura. No entanto, a esposa do utente disse-lhe que se apresentasse níveis de colesterol normais ele não tinha nada com que se preocupar a) Quem está correto? Explique a sua resposta. b) Porque o fibrinogénio encontra-se também elevado ? c) Comente a frase – A aterosclerose é uma condição inflamatória d)  Na determinação desta  PCR de alta sensibilidade, qual o método utilizado?

Resposta. Embora os níveis de colesterol estivessem dentro dos limites normais para HDL e colesterol total, vários estudos recentes indicam que um aumento da PCR tem sido associado a um risco maior de um futuro ataque cardíaco. Níveis mais altos de fibrinogénio também estão associados a um risco aumentado de um evento cardiovascular futuro, embora o aumento do fibrinogénio não seja um fator de risco tão grande quanto o aumento da PCR. Um aumento de ambas as proteínas de fase aguda indica um processo inflamatório subjacente. Tal processo é associado à aterosclerose, uma patologia que afeta os vasos sanguíneos coronários e outras artérias. A esposa do utente deve incentivá-lo a seguir uma dieta saudável e a perder peso através de exercício.. 

Scene 31

Embora os níveis de colesterol estivessem dentro dos limites normais para HDL e colesterol total, vários estudos recentes indicam que um aumento da PCR tem sido associado a um risco maior de um futuro ataque cardíaco. Níveis mais altos de fibrinogénio também estão associados a um risco aumentado de um evento cardiovascular futuro, embora o aumento do fibrinogénio não seja um fator de risco tão grande quanto o aumento da PCR. Um aumento de ambas as proteínas de fase aguda indica um processo inflamatório subjacente. Tal processo é associado à aterosclerose, uma patologia que afeta os vasos sanguíneos coronários e outras artérias. A esposa do utente deve incentivá-lo a seguir uma dieta saudável e a perder peso através de exercício.

Outros efeitos da PCR ….. Induz a produqäo de moléculas de adesäo celular, tais como a endotelina-l Localiza-se na intima aterosclerötica Atenua a produqäo de Oxido nitrico Reduz a vasoreactividade endotelial Induz a produqäo de factor tecidular nos monöcitos Medeia a absorqäo de LDL pelos macröfagos Induz a expressäo do inibidor do activador do plasminogénio - I Induz a oxidaqäo do colesterol LDL Induz a activaqäo do complemento Medeia o recrutamento de monöcitos para a parede arterial Rev Port Cardiol.. 

Scene 32

Induz a produqäo de moléculas de adesäo celular, tais como a
endotelina-l
Localiza-se na intima aterosclerötica
Atenua a produqäo de Oxido nitrico
Reduz a vasoreactividade endotelial
Induz a produqäo de factor tecidular nos monöcitos
Medeia a absorqäo de LDL pelos macröfagos
Induz a expressäo do inibidor do
activador do plasminogénio - I
Induz a oxidaqäo do colesterol LDL
Induz a activaqäo do complemento
Medeia o recrutamento de monöcitos para a parede arterial
Rev Port Cardiol.

PCR de alta sensibilidade ( PCR- as ) ou Ultrassensível. 

Scene 33

PCR de alta sensibilidade ( PCR- as ) ou Ultrassensível

O termo PCR de alta sensibilidade ( PCR- as ) é o termo aplicado ao método desenvolvido nos anos 90, que deteta concentrações séricas de PCR em níveis mais baixos que os métodos laboratoriais prévios.  O seu limiar de deteção é muito baixo (de 0,3 mg/L), pelo que deve ser  usado  método  laboratorial  adequado quando  se pretende avaliar o risco cardiovascular associado à inflamação vascular sistémica crónica da aterosclerose. Para risco cardiovascular • Risco alto:> 3mg/ dL • Risco médio:1 a 3mg/ dL • Risco baixo:< 1mg/ dL OBS: A interpretação dos valores para risco cardiovascular somente pode ser realizada na ausência de quadros inflamatórios sistêmicos.

Doseamento da PCR- as. Por determinação da luz transmitida e dispersada. 

Scene 34

Por determinação da luz transmitida e dispersada

o
o
o
o
o
oo
Light source
Light detector
turbidimetry
Nephelometry
900 light scatter
FIGURE 10-4 Principles of nephelometry. The light detection
device is at an angle to the incident light, in contrast to turbidity,
which measures light rays passing directly through the solution.

Table 10-1
TECHNIQUE
Nephelometry
Comparison of Precipitation Techniques
Radial immunodiffusion
Ouchterlony double
diffusion
Immunoelectrophoresis
Immunofixation
electrophoresis
APPLICATION
Immunoglobulins, comple-
ment, g-reactive örotei@
other serum proteins
Immunoglobulins,
complement
Complex antigens such as
fungal antigens
Differentiation of serum
proteins
Over- or underproduction
of antibody
SENSITIVITY
AB/ML)
1-10
10-50
20-200
20-200
Variable
PRINCIPLE
Light that is scattered at an angle is mea-
sured, indicating the amount of antigen
or antibody present.
Antigen diffuses out into gel that is infused
with antibody. Measurement of the radius
indicates concentration of antigen.
Both antigen and antibody diffuse out from
wells in a gel. Lines of precipitate formed
indicate the relationship of antigens.
Electrophoresis of serum followed by
diffusion of antibody from wells.
Electrophoresis of serum followed by
direct application of antibody to the gel.