Laboratorio extracción ADN

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Scene 1 (0s)

Laura Valentina Rios Torres – 1103 – Biología

Laboratorio E xtracción ADN

Laboratorio E xtracción ADN

Scene 2 (9s)

Al extraer el ADN debemos purificarlo de algunos contaminantes celulares. Necesitamos células ya que allí se encuentra el ADN, Hay muchas células en nuestro cuerpo que dentro de su núcleo tienen a cerca de dos metros de ADN

3.Cual es la utilidad para la investigación científica este tipo de protocolos para extracción de los ácidos nucleicos.

- Se utiliza para analizar a pacientes con diferentes padecimientos como enfermedades genéticas, cáncer, infecciones, etc. Se puede analizar a un recién nacido para detectar una enfermedad genética, analizar pruebas forenses o estudiar un gen involucrado en el cáncer.

Cromosoma.

ADN

Histonas

Célula, núcleo

Recolectar ADN

L a piel del interior de la boca pierde miles de células todos los días, células que vamos a necesitar para el laboratorio .

Scene 3 (50s)

1. Recolectar células de las mejillas

centrifuge Micro- Centrifuge opipetto water bath

resu concentra p ethanol ion buffer It solution is solution

Procedimiento:

Materiales y equipos que se necesitan para purificar el ADN de las células de la mejilla

B año de agua tibia Micro-centrifugadora Micro pipetas H isopo bucal Tubos de muestra Solución de lisis S olución salina concentrada T ampón de resuspensión Etanol Alcohol Isopropílico

Orog the sunb •o of nuuth to

Se coloca el hisopo en el tubo Sppendorf , podemos ver las pequeñas células de la mejilla, en su interior el núcleo, y allí el ADN

Usando las micro pepetas , añade un poco de Solución de Lisis al tubo, esta es para separar.

Colocar el tubo en el agua caliente

2. Reventar células abiertas para liberar ADN

Scene 4 (1m 29s)

L a solución de lisis contiene dos ingredientes importantes: detergente y una enzima llamada proteinasa k .

El detergente altera la membrana celular y la envoltura nuclear, lo que hace que las células se abran de golpe y liberen su ADN

El ADN todavía está envuelto muy fuertemente en unas proteínas llamadas hisonas , y la proteinasa k corta las histonas o libera el ADN

Las células han permanecido en el baño de agua tibia el tiempo suficiente para que el ADN se libere

Agregue un poco de solución de sal concentrada a su tubo

L a sal hace que las proteínas y otros desechos celulares se agrupen

Micro- Centrifuge

Para equilibrar el centrifugado, se coloca un tubo que contiene agua frente al tubo.

Los grumos pesados de proteína y detritos celulares se hunden hasta el fondo del tubo, mientras que las hebras de ADN permanecen distribuidas a través del líquido

Con la micro pipeta se retira con cuidado el líquido superior (que contiene ADN) y se coloca en un tubo limpio.

3. Separar el ADN de las proteínas y los desechos.

Scene 5 (2m 21s)

4. Aislar ADN concentrado

Añadir alcohol isopropílico al tubo

Invertir varias veces el tubo, debido a que el ADN no es soluble (no permanece disuelto) en alcohol isopropílico . Se puede ver el ADN agrupado a simple vista

Se coloca el tubo en la centrífuga. Esta vez, después de que la muestra gire en la centrifugadora, el ADN se hunde hasta el fondo del tubo.

Micro- Centrifu ge

Una vez que se retira el líquido y se deja secar el ADN, y se puede volver a disolver en la otra solución. Se puede guardar en el congelador durante muchos años o puede pasar a un siguiente experimento.

Así acabamos de extraer el ADN.

Scene 6 (2m 57s)

1. Que reactivos se necesitan para el aislamiento adecuado de ADN 2. Para que sirve cada uno de los reactivos utilizados en la práctica para extraer los ácidos nucleicos

Detergente El detergente altera la membrana celular y la envoltura nuclear, lo que hace que las células se abran de golpe y liberen su ADN. disuelve las grasas o lípidos, que es el componente principal de la membrana plasmática y nuclear de las células.

Su objetivo es romper partes de la pared celular o la célula completa para liberar moléculas biológicas. Contiene dos ingredientes importantes:

Solución de Lisis

Y una enzima llamada proteinasa k: El ADN todavía está envuelto muy fuertemente en unas proteínas llamadas hisonas , y la proteinasa k corta las histonas o libera el ADN

Scene 7 (3m 35s)

Solución salina concentrada

La sal hace que las proteínas y otros desechos celulares se agrupen; actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que hace que precipiten y se separen más fácilmente del ADN para poder obtenerlo con una mayor pureza.

Alcohol I sopropílico

El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse, de ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol, ya que el ADN no es soluble (no permanece disuelto) en alcohol isopropílico por esto cuando se encuentra en alcohol precipita. Por este motivo, nuestras hebras de ADN comienzan a hacerse visibles en la interfase entre la mezcla y el alcohol. Además de permitirnos distinguirlo, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales quedan en la solución acuosa.

Scene 8 (4m 14s)

3.Cual es la utilidad para la investigación científica este tipo de protocolos para extracción de los ácidos nucleicos.

Se puede analizar a un recién nacido para detectar una enfermedad genética, analizar pruebas forenses o estudiar un gen involucrado en el cáncer u otras patologías.

4. capture pantalla y en este informe entregue evidencias de lo realizado

5. Evalué su experiencia y aprendizaje en un párrafo

Al realizar correctamente el procedimiento para aislar el ADN lo podemos observar a simple vista, en este caso se realizó con células del interior de la boca, pero se puede con células vegetales, de otro lado del cuerpo y demás. Pude reconocer que la solución de lisis ayuda a romper la pared celular y corta las histonas para liberar el ADN, luego de esto se utiliza una concentración de sal para aislar las proteínas y desechos celulares para que el ADN quede mas puro y por ultimo el alcohol para poderlo distinguir mucho mejor. Es importante agitar muy bien las mezclas, en el laboratorio se hizo a través de una centrifugadora para mezclar muy bien los compuestos que se le agregan y así en estos casos separar el ADN. Este simulador muestra los pasos a seguir en un laboratorio real, y por lo tanto es muy útil a la hora de distinguir los diferentes reactivos, su función, el procedimiento correcto y los resultados esperados para Aislar el ADN a partir de las células en una muestra.