1).Introduction à l’anatomie pathologique

[Audio] ENSEIGNEMENT THEMATIQUE D'ANATOMIE-CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES Année universitaire 2023-2024 Introduction à l'anatomie et cytologie pathologiques Plan Introduction Définition Buts Historique.

[Audio] Démarche diagnostique Matériel étudié Méthodes Technique standard Techniques particulières Histochimie ImmunoHistohimie ,Immunofluorescence Microscopie électronique biologie moléculaire Déontologie Conclusion Objectifs Objectif général Situer la place de l'examen anatomo-pathologique dans la démarche diagnostique..

[Audio] Objectifs spécifiques Définir l'anatomie pathologique Citer les buts de l'examen anatomo-pathologique ( Poser le diagnostic, Établir le pronostic, Évaluer les effets thérapeutiques Indiquer les examens (anatomo-pathologiques) utiles dans la démarche diagnostique Distinguer les différents types de prélèvements en anatomie pathologique Connaitre les différentes techniques utilisées en anatomie et cytologie pathologiques Comprendre l'importance de la confrontation des aspects morphologiques aux données cliniques, biologiques Appliquer les règles d'éthique et de déontologie à l'anatomie pathologique (secret médical, collaboration multidisciplinaire) Introduction-Définitions L'anatomie Pathologique (ou pathologie): Est une discipline médicale qui étudie les lésions associées ou provoquées.

[Audio] par les maladies sur les organes, tissus ou cellules, Lésions: Altérations morphologiques des organes décelables par tout moyen d'observation Utilise des techniques basées sur la morphologie: Macroscopique Microscopique But de l'anatomie pathologique: -Etablir le diagnostic des maladies -Evaluer le pronostic -Comprendre les causes et les mécanismes des lésions..

[Audio] Historique Spécialité médicale ayant émergé au milieu du XIXème siècle A constitué élément structurant de la médecine moderne Par le développement des corrélations et confrontations anatomocliniques.

[Audio] Démarche de l'anatomie pathologique Est basée sur une analyse sémiologique qui compare les tissus normaux et les tissus pathologiques. Les lésions sont confrontées aux données: Cliniques , Biologiques.

[Audio] D'imagerie Indispensable C'est la corrélation anatomo-clinique Permet une interprétation synthétique Aboutit à un diagnostic Matériel d'étude et méthodes Les techniques anatomo-pathologiques s'appliquent à des prélèvements.

[Audio] de tissus (histopathologie) ou de cellules (cytopathologie) - Durant la vie: (Prélèvement cytologique, biopsie , pièce opératoire...) - Après la mort (autopsie, aussi appelée nécropsie). Prélèvements cytologiques: « Cytologie » - Raclage (Frottis Cervico Utérin) (FCU) - Aspiration (bronchique) - Desquamation (liquides: ascite, pleural, urines) - Apposition (ganglion….) - Cytoponction à l'aiguille fine avec ou sans aspiration.

[Audio] (thyroïde, sein, ganglion, masse tumorale …) Les produits de ponctions, empreintes, frottis seront étalés sur lames propres et sèches L'étalement est un temps capital de la cytologie et doit être parfaitement maitrisé par le préleveur « opérateur dépendant »: Étalement du produit de ponction déposé à une extrémité de la lame avec une autre lame, d'une manière uniforme, sans retour en arrière, en dissociant sans écraser les placards cellulaires pour obtenir un étalement en couche monocellulaire Matériel pour prélèvement cytologique.

[Audio] Technique de prélèvement Ex: Cytoponction thyroïdienne.

[Audio] Les liquides Étale sur lames sont Ou inclut transmis rapidement au pathologiste qui les: Centrifuge , en paraffine le culot de centrifugation « cytobloc ».

[Audio] 1.Centrifugation et récupération du culot 2. Dépôt du culot sur la lame 3. Étalement sur lame Fixation.

[Audio] NB: le diagnostic cytologique est un diagnostic d'orientation et non de certitude Méthodes Fixation Coloration Séchage à l'air May-Grunwald-Giemsa (MGG) FC: Coloration Cytospray Papanicoulaou Papanicoulaou Alcool éther Papanicoulaou Harris-Shorr.

[Audio] coloration MGG Cytoponction: La cytologie en milieu liquide Contrairement à la technique classique, les cellules recueillies sont déposées dans un.

[Audio] contenant hermétique où se trouve déjà un liquide de conservation. Ce contenant est par la suite envoyé dans un laboratoire équipé pour produire la lame correspondante. prélèvement de cellules sur le col utérin des patientes à l'aide d'une brosse cervicale spéciale, les cellules recueillies sont déposées dans un contenant hermétique où se trouve un liquide de conservation. Intérêt.

[Audio] Cytologie conventionnelle Avantages Méthode de dépistage la plus commune Avantages Coût faible Inconvénients Déperdition d'un certain% de cellules avec la spatule ou la brosse cervicale Présence de sang ou de mucus.

[Audio] La biopsie La biopsie est le prélèvement d'un fragment de tissu effectué sur un être vivant. Il peut être réalisé: Au bistouri, à l'aiguille, à la griffe ou à l'emporte pièce («punch»). La biopsie peut être effectuée à ciel ouvert, ou sous endoscopie ou sous contrôle radiologique Lorsque l'ensemble de la lésion est prélevé, on parle de biopsie-exérèse Pièce opératoire Exérèse partielle ou complète d'un ou plusieurs.

[Audio] organes séparés ou en monobloc. Pièces nécropsiques L'autopsie est suivie d'un examen microscopique des différents viscères. Elle doit être pratiquée le plus tôt possible après la mort afin d'éviter au maximum l' autolyse cadavérique. L'autopsie peut être réalisée dans un but: �Judiciaire (ou médico-légal): Apporter des éléments utiles à l'enquête (causes, circonstances, date de la mort...). �Scientifique (ou médico-scientifique): - Enseignement: pour l'étudiant qui pourra observer des faits concrets - Etudier les effets des traitements - Effectuer des recherches scientifiques.

[Audio] �De santé publique dans l'établissement de statistiques exactes de mortalité dans une population Examen extemporané Examen histologique per-opératoire, rapide (en quelques minutes). Il a pour but de donner un diagnostic immédiat, qui peut modifier le geste chirurgical en cours (vérifier la malignité, élargir une exérèse …)..

[Audio] Il s'effectue sur des coupes de fragments tissulaires congelés. Son interprétation peut être difficile et nécessiter l'attente de l'inclusion en paraffine Cheminement du prélèvement Enregistrement Chaque prélèvement est enregistré et reçoit un numéro d'identification unique. Il doit être accompagné d'une fiche de renseignements remplie par le médecin prescripteur qui doit mentionner : La date (jour et heure) les nom et coordonnées du médecin prescripteur L'identité du patient : nom, prénom(s), Date de naissance, sexe ;.

[Audio] Le siège, La nature du prélèvement (biopsie ou exérèse) ; Les circonstances cliniques et paracliniques qui ont motivé le prélèvement et éventuellement les hypothèses diagnostiques Les antécédents pathologiques du patient, Les antécédents d'examens anatomopathologiques effectués dans un autre laboratoire L'aspect macroscopique ou endoscopique des lésions (un compte-rendu opératoire peut être utilement joint), L'aspect d'imagerie, en particulier pour les tumeurs osseuses ; La nature des traitements éventuellement administrés au malade Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 1 – Fixation 2 – Macroscopie.

[Audio] 3 – Mise en circulation 4 – Inclusion en paraffine 5 – Confection de coupes 6 – Étalement 7 – Coloration de routine (HES) 8 – Interprétation les différentes étapes sont fondamentales pour assurer une bonne interprétation histologique aboutissant à un compte rendu anatomo pathologique précis Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 1 - Fixation Indispensable: conservation de la morphologie cellulaire,.

[Audio] Immédiate ou au moins très rapidement après l'obtention du prélèvement. Nature du fixateur: Formol tamponné 10% Quantité: 10 fois le volume de la pièce Durée de fixation: Biopsies : 4 à 6 h Pièces opératoires. 24 h au moins à 48h Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 2 - Macroscopie.

[Audio] Biopsies : Nombre Taille des fragments , Mise en cassettes en totalité Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 2 - Macroscopie Les pièces opératoires sont: Mesurées Pesées.

[Audio] Orientées Décrites : il est utile de noter la taille, l'aspect et la consistance des lésions tumorales ainsi que leur rapport avec le tissu sain avoisinant et les limites d'exérèse. Échantillonnage, orientation des prélèvements Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 2 - Macroscopie.

[Audio] Echantillonnage pertinent des lésions, du tissu avoisinant, des limites d'exérèse. Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 3 -Mise en circulation des prélèvements Déshydratation: 6 bains d'alcool à des.

[Audio] concentrations progressives Eclaircissement: Remplacement de l'alcool par le xylène ou toluène Imprégnation en paraffine Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 4 - Inclusion en paraffine.

[Audio] Techniques standards d'anatomie pathologique Étapes techniques 5 - Confection de coupe au microtome Le bloc de paraffine contenant le tissu est coupé en fins rubans de 3 à 5 µm..

[Audio] 6 - Étalement sur lames. 6 - Étalement sur lames.

[Audio] 7-Colorationstandard: (Hématoxyline-Eosine)«HE» L'Hématoxyline�noyauxenbleu L'Éosine �.

[Audio] cytoplasme en rose Appareil automatique à coloration Coloration manuelle Techniques particulières:Histochimie Mise en évidence de:.

[Audio] Substances endogènes ou exogènes cellulaires (glycogène, mucus, pigments…) ou de la matrice extracellulaire (collagènes, fibres élastiques, amylose...) Structures tissulaires normales ou pathologiques Microorganismes (bactéries, parasites, champignons) Suspectées par le pathologiste lors de son analyse initiale sur les coupes de technique standard. Une nouvelle lame est nécessaire pour chaque coloration Chaque coloration spéciale a un protocole technique propre utilisant des substances chimiques très Histochimie.

Histochimie.

[Audio] - Bleu Alcian: - PAS: glycogène/ mucines neutres - Trichrome de Masson: fibres de collagène - Coloration aux sels d'argent: fibres de réticuline - Perls: fer sérique Bleu Alcian Trichrome de Masson Réticuline.

Perls.

Examen.

[Audio] Immunohistochimique (IHC) Consiste à révéler sur coupe histologique, par réaction antigène-anticorps, la présence de récepteurs antigéniques Cytoplasmiques. Membranaires, Intranucléaires , 1 - Antigène 2 - Anticorps 1 3 - Anticorps 2, 4 - Complexe Avidine-biotine-péroxydase.

[Audio] Automate d 'immunohistochimie. Automate d ’immunohistochimie.

[Audio] Mises en évidence d'antigènes sur les préparations histologiques à l'aide d'anticorps spécifiques, révélés par une technique d'immunoperoxydase indirecte)..

[Audio] IHC Modes d'expression cellulaireTTF-1. IHC Modes d’expression cellulaireTTF-1.

[Audio] Marquage nucléaire Marquage cytoplasmique Marquage membranaire Intérêt de l'immunohistochimie Typage des tumeurs malignes peu différenciées (primitive ou.

[Audio] métastatique), des lymphomes et des sarcomes Orientation sur l'origine primitive d'un carcinome Détection de micrométastases Recherche de marqueurs pronostiques et thérapeutiques Micrométastase ganglionnaire Détection d'agents infectieux tumorales dans un lymphome Hodgkinen par un anticorps anti-CD30. Marquage nucléaire des cellules d'un carcinome mammaire par un anticorps anti-récepteurs aux oestrogènes. Marquage paragolgien des cellules.

[Audio] L'immunofluorescence directe pour mettre en évidence les dépôts tissulaires d'immunoglobulines et de complément sur prélèvements congelés Biopsies cutanées Biopsies rénales.

[Audio] Observation au microscope à fluorescence Microscopie électronique La ME repère certains micro-organismes et les détails de l'architecture cellulaire et tissulaire. Elle nécessite une fixation rapide et particulière (glutaraldéhyde), suivie d'une inclusion en résine et de coupes semi-fines et ultrafines . Elle est moins utilisée (en raison du développement de l'IHC et de biologie moléculaire comme l'hybridation in situ)..

[Audio] LIPOFUSCHINES Techniques de biologie moléculaire Les prélèvements tissulaires peuvent faire l'objet d'analyses moléculaires de l'ADN et l'ARN des cellules tumorales..

[Audio] Les lésions du génome décelées par biologie moléculaire peuvent aider au diagnostic de tumeur, ou prédire la réponse tumorale à un traitement Intérêt Diagnostic Pronostic Théranostique Conseil génétique Hybridation In Situ: Exemple de technique FISH Permet la détection de séquences d'ADN spécifiques, à l'aide d'une sonde ADN double brin détectés grâce à un marqueur Fluorescent.

[Audio] FISH Amplification du gène Her2: spots rouges+++.

[Audio] ExpressiongéniqueenMicroarrayGeneexpressionarrays Lesanalysesdesprofilsd'expressiondesgènessontbaséessurunsupportbiendéfini,celuidemicroarraysd'ADNouADNccomportantdesacidesnucléiquesimmobilisésdemanièreordonnéesurunesurfaceplane. Permetdeclasserunensembledetumeursselonleurgravitéetleurpronosticenfonctiondesgènesqu'ellesexperiment.